临床试剂是经过权威机构认可的，如FDA，CFDA等，而科研试剂一般是厂家自行研制，不需要通过权威机构验证的试剂。
用于临床诊断的试剂盒是需要注册医疗器械使用许可证的，科研试剂不需要。
临床产品一般仅检测血清血浆等单一样本类型，科研试剂会比临床试剂种类多范围广。但一般来说临床产品的质量，稳定性等性能会优于科研试剂。
目前我们的试剂盒检测的种属主要为人，小鼠和大鼠，小部分指标涉及猴，兔，猪和鸡等特殊种属。对于那些命名中带有特定物种名称的试剂盒（如人）是专门针对此物种的。如果说明书中没有指明物种，该试剂盒即在常规哺乳动物种属内是通用的。如果检测物种特殊，建议先跟技术支持确认样本适用性。
试剂盒的准确性和稳定性都是很好的，所有产品在发货前必须经过3步质检来保证产品质量。另外，我们Elabscience自行研发的特殊稳定剂，可以很好地保证各试剂的活性；
试剂盒有效期为6个月；
试剂盒的货期为2-3天，加冰袋顺丰发货，保证稳定的4℃运输条件。
试剂盒除 BSA 作为保护蛋白外，无任何其他动物来源成分。此外，试剂盒防腐剂采用毒性较低的 proclin 300，安全环保。
试剂盒的检测范围设定跟本身原料性质以及能检测的样本类型是相关的，很多指标在某些细胞中表达量较低而在血清中浓度很高，但为了满足测值较低样本的检测需求，试剂盒的灵敏度会较高，但这不会影响浓度高的血清等样本的检测。
如果文献报道中样本血清浓度在ug级别，那么在实际检测中，您需要将样本进行稀释，使样本OD值落在试剂盒检测范围之内，最后计算样本浓度时需乘以相应的稀释倍数。
我们试剂盒有效期为半年，您将试剂盒拆封后按照说明书上的存放温度分组分保存即可，试剂盒在存储无问题的情况下，3个月后使用问题不大，但需要注意4度放置试剂不要贴冰箱内壁存放，可能会因为冰箱出霜冻住而影响试剂的活性。
您如果要进行多次实验，需要将不用的板条提前拆卸并放置于铝箔袋中，按照说明书要求的温度密封保存。
灵敏度是试剂盒多次检测空白样本计算得到的最低检出限，只有样本浓度高于试剂盒的灵敏度即检测是有意义的。
试剂盒检测范围是表示当样本浓度落在该范围内，其浓度和检测OD值有良好的线性关系，能够准确定量样本的浓度情况。
96T试剂盒，标准品&样本均不做复孔，最多检测88个样本；标准品做复孔，样本做单孔，最多检测80个样本；标准品做单孔，样本做复孔，最多检测44个样本；标准品&样本均做复孔，最多检测40个样本。
48T试剂盒，标准品&样本均不做复孔，最多检测40个样本；标准品做复孔，样本做单孔，最多检测32个样本；标准品做单孔，样本做复孔，最多检测20个样本；标准品&样本均做复孔，最多检测16个样本。
如果做3复孔，检测的样本数量会相应减少。
为了保证实验结果的准确性，我们建议标准品和样品都做复孔检测。当然，ELISA实验并非要求一定做复孔/3复孔，客户可根据自己的需求设定实验的复孔与否。
试剂盒检测范围不等同于样本中待测物的浓度范围，建议实验前通过相关文献预估样本中待测物的浓度并通过预实验确定样本的实际浓度情况。如果是常规样本类型，可以咨询ELISA技术支持以获取样本的推荐稀释倍数并安排预实验检测。
如果样品中待测物浓度过高或过低，请对样本做适当的稀释或浓缩。如果样本中的分析物浓度远低于试剂盒的最低检测线，建议选择灵敏度更高的试剂盒来检测。
红色管盖的采血管可能为含涂层的促凝管和不含涂层的普通管。含涂层的促凝管(红色/黄色/橘色)一般上下颠倒5-10次后静置5-20min即可离心处理。不同促凝剂发生凝集的时间有差异，建议咨询抗凝管厂家。
常规的不含涂层的采血管(红色)一般采血后室温静置60min左右即可自发地完全凝集并进行离心处理。
抗凝管(绿色和紫色管盖)一般上下颠倒5-10次后静置5-10min后即可离心处理，最长不超过30min。
一般实验用成年小鼠致死采血体积为0.8-1.2mL，理论上可以获得300-500uL血清/血浆。常规采血方法：摘眼球采血,断头采血。
一般实验用成年大鼠致死采血体积为3-8mL左右，理论上可以获得1.5-3mL血清/血浆。常规采血方法：断头采血，股动脉采血，心脏采血等。
不致死采血方法多为眼眶静脉丛采血。小鼠采血量为0.1-0.2mL，大鼠采血量为0.4-0.6mL。
样品收集后若在1周内进行检测可保存于2-8℃，若不能及时检测，请按一次使用量分装，冻存于-20℃(1个月内检测)，或-80℃(3个月内检测)，避免反复冻融。在检测前，冷冻过的样本应缓慢地融化并离心除去冻融过程产生的沉淀物。室温混匀后使用。
- 静脉采血时，回抽压力不宜过大
- 一次性采血量不宜过少
- 采集的全血不宜激烈振荡
- 离心转速不宜过大
- 收集的全血需尽快处理成血清/血浆，全血不能冻融
- 若需要麻醉采血，需使用没有溶血作用的麻醉剂
手工匀浆：将组织称重，剪碎呈1 cm3大小，倒入玻璃匀浆管中，加入匀浆介质，左手持匀浆管将下端置于冰浴中，右手将捣杆垂直插入套管中，上下转动研磨数十次（5～8 min），组织充分匀浆；或者倒入研钵中，加入液氮进行研磨，充分研磨后，加入匀浆介质，再将制好的匀浆吸取到EP管中备用。
机械匀浆：将已称重的组织装入EP管，加入匀浆介质，用组织匀浆机，在低温条件下，60 Hz，90 s研磨制成组织匀浆。皮肤、肌肉组织及植物组织等可适当延长匀浆时间。
不能统一减少样本/试剂上样体积后检测。ELISA实验中，每一步的上样体积都需要严格遵照说明书要求，否则实验体系改变，结果会不准确。如果客户的样本体积确实不够，请及时联系技术支持确认样本是否能够稀释，并通过预实验判断样本浓度情况。如果是试剂体积不够，请根据实际体积减少待测孔数，不能稀释后检测。
高脂样本含有脂肪，不是均质溶液，若直接上样会影响抗原抗体的结合，测值不准确。建议先大转速(5000×g)离心，静置10min后取中层较澄清液体，再用大转速(≥5000×g)离心一次取中下层清液用于检测。
组织样本：组织研磨后，将其-80℃放置1小时/液氮放置0.5小时，然后置于30℃水浴锅中轻微振荡使其迅速融化，此操作反复1-2次即可。
细胞样本：按上述冻融的操作反复2-3次。若为膜蛋白可以适当超声一下，但需要控制好超声的温度和频率。
样本中建议提前加入蛋白酶抑制剂。常规推荐：PMSF。
使用超声波细胞破碎器超声处理悬浮液来裂解细胞（参考：用Soniprep150超声波发生器以振幅14um超声处理30秒，破碎细胞；或者用超声破碎仪，200W，2秒/次，间隙3秒，总时间3-5分钟或者400安培，5秒/次，间隙10秒，反复3-5次）。再于2-8℃，以1500×g离心10分钟，去除细胞碎片，收集上清液。超声过程中注意控制温度。
不建议使用商品化的裂解试剂。不同的产品组成有差异且裂解能力也不同，如果试剂含有SDS等表面活性剂会对目的蛋白的天然构象造成影响，可能会出现测值明显降低或者假阴性。此外，由于是新引入的溶剂，不确定基质干扰的情况，可能会造成本底升高，从而影响测值准确性。
建议客户做技术重复的，一方面确认操作手法，一方面验证和提高实验结果的准确性。
ELISA实验中的阳性对照可以认为就是标准品，或者另外购买阳性质控品。阴性对照是与待捡物具有同源性和同质性的空白基质或者已知浓度很低的基质溶液，一般较难获取，如果有可以设置为阴性对照。常规是设定空白对照，即样本稀释液。
稀释100倍：一步稀释。取5μL样本到495μL标准品&样本稀释液内，做100倍稀释；
稀释1000倍：两步稀释。取5μL样本到95μL标准品&样本稀释液内，做20倍稀释，再取5μL 20倍稀释样本到245μL标准品&样本稀释液内，做50倍稀释，总共稀释1000倍；
稀释100000倍：三步稀释。取5μL样本到195μL标准品&样本稀释液内，做40倍稀释，再取5μL 40倍稀释样本到245μL标准品&样本稀释液内，做50倍稀释，最后取5μL 2000倍稀释样本到245μL标准品&样本稀释液内，做50倍稀释，总共稀释100000倍；
每步稀释时取液量不少于3μL，稀释倍数不超过100倍。每步稀释都需混合均匀，避免起泡。
说明书上的标曲是指示标曲，主要是用于呈现拟合后标曲的形态以及最高/最低OD值的质控范围。而由于受实验操作、实验环境以及仪器参数设定等因素的影响，客户实际做的标曲OD值可能会跟说明书不一致（整体偏高或偏低），这种情况，建议通过在显色阶段控制前4个蓝色孔有明显颜色梯度以及标曲最大OD值在1.2以上，标曲的相关系数在0.99以上即可作为有效标曲。
试剂盒内各种稀释液不能混用。
不同批次试剂盒内各组分不能混用（终止液除外）。
试剂盒内有配备专门的标准品&样本稀释液，可用于稀释样本。如果样本稀释液缺漏，不建议直接用生理盐水/PBS替代，这两种溶剂跟试剂盒体系不能完全匹配，可能会对测值结果的准确性有影响。
虽然 ELISA 的操作步骤是相同的，但每次实验的各种影响因数都是有所变化的，所以每次实验时必须重新制作标准曲线，以便得到更准确可靠的检测结果。
如果需要做多次实验，溶解后的最高浓度标准品可以分装保存于-20℃，避免反复冻融，半个月内使用有效(若说明书有额外强调溶解后标准品的保存和使用，请参照说明书的要求)。
为保证结果的准确度，不建议减少标曲的孔数，请至少保证检测 6 个不同的标准品浓度（含空白孔 )。
标准品本身是冻干粉，溶解后会形态改变且浓度降低，稳定性相较粉末状会降低很多，如果直接溶解并放室温直至完全做完实验，是不能再次使用的。
如果客户确实需要做多次实验且中间会有时间间隔，建议将刚溶解充分的标准品进行分装（2-3支），1支做本次试验，剩余即刻放-20℃（恒定该温度）保存，半个月内使用基本无明显影响。
手工匀浆：将组织称重，剪碎呈1 cm3大小，倒入玻璃匀浆管中，加入匀浆介质，左手持匀浆管将下端置于冰浴中，右手将捣杆垂直插入套管中，上下转动研磨数十次（5～8 min），组织充分匀浆；或者倒入研钵中，加入液氮进行研磨，充分研磨后，加入匀浆介质，再将制好的匀浆吸取到EP管中备用。
机械匀浆：将已称重的组织装入EP管，加入匀浆介质，用组织匀浆机，在低温条件下，60 Hz，90 s研磨制成组织匀浆。皮肤、肌肉组织及植物组织等可适当延长匀浆时间。
不能统一减少样本/试剂上样体积后检测。ELISA实验中，每一步的上样体积都需要严格遵照说明书要求，否则实验体系改变，结果会不准确。如果客户的样本体积确实不够，请及时联系技术支持确认样本是否能够稀释，并通过预实验判断样本浓度情况。如果是试剂体积不够，请根据实际体积减少待测孔数，不能稀释后检测。
高脂样本含有脂肪，不是均质溶液，若直接上样会影响抗原抗体的结合，测值不准确。建议先大转速(5000×g)离心，静置10min后取中层较澄清液体，再用大转速(≥5000×g)离心一次取中下层清液用于检测。
组织样本：组织研磨后，将其-80℃放置1小时/液氮放置0.5小时，然后置于30℃水浴锅中轻微振荡使其迅速融化，此操作反复1-2次即可。
细胞样本：按上述冻融的操作反复2-3次。若为膜蛋白可以适当超声一下，但需要控制好超声的温度和频率。
样本中建议提前加入蛋白酶抑制剂。常规推荐：PMSF。
使用超声波细胞破碎器超声处理悬浮液来裂解细胞（参考：用Soniprep150超声波发生器以振幅14um超声处理30秒，破碎细胞；或者用超声破碎仪，200W，2秒/次，间隙3秒，总时间3-5分钟或者400安培，5秒/次，间隙10秒，反复3-5次）。再于2-8℃，以1500×g离心10分钟，去除细胞碎片，收集上清液。超声过程中注意控制温度。
不建议使用商品化的裂解试剂。不同的产品组成有差异且裂解能力也不同，如果试剂含有SDS等表面活性剂会对目的蛋白的天然构象造成影响，可能会出现测值明显降低或者假阴性。此外，由于是新引入的溶剂，不确定基质干扰的情况，可能会造成本底升高，从而影响测值准确性。
RCF = 1.119 x 10-5 x (rpm)2 x r ，其中r 表示离心机转轴中心与离心管中心的距离，单位为cm。由于离心管的位置由转子（rotor）决定，因此r 必须由查阅相关转子的参数而得。
样本中非目标分析物的其他成分统称为基质，当基质对实验结果产生影响时即为基质效应，也称干扰效应。出现基质效应时，结果可呈现假偏高或偏低，对样本进行回收率验证即可验证基质效应是否存在。优化样本稀释液，可在一定程度上消除基质效应的影响。
双波长测值是为了校正酶标板和其他非特异性物质的干扰造成的吸光度。我们的酶标板经过严格挑选，背景值很低，如果您的仪器不能设置双波长，可只用推荐的单波长检测，无需校正。
可以自行从网上下载Origin软件的安装包。或点击此链接：https://pan.baidu.com/s/1oWmEgxEdGTyHSU5LylYxIQ 获取百度网盘中Origin 9.1的软件资源。提取码：elab。(安装时请参照压缩包内破解方法)安装软件后，请进入“Elabscience”微信公众号，在“技术资源—ELISA指南”版块，可以通过“如何用Origin计算ELISA实验结果”的技术文章来获取Origin软件的详细操作步骤及更多信息。(可以直接贴链接跳转)
抗原抗体特异性反应时，生成结合物的量与反应物的浓度有关。在一定量的抗体中加入不同量的抗原或在一定量的抗原中加入不同量的抗体， 只有在两者分子比例合适时才出现最强的抗原-抗体反应。当抗原或抗体过剩时产生的假阴性现象，我们称之为钩状效应(hook effect)。在ELISA实验中，为避免钩状效应，请预估样本浓度选择合适的稀释倍数(或咨询技术支持)，并通过预实验选择最佳稀释倍数。